抗日战争初期，国军中校马烽领命组建“025敢死队”，准备伺机对南京城内的日寇发动袭击。他从即将被执行死刑的犯人里挑选出五人，其中包括苏维埃政府军械部长麻老五、中情局特工徐飞虎、飞贼唐人杰，还有强大龙和朱大山。经过周密部署，马烽带领队员潜入被日寇侵占的南京城，成功营救了两名援华的美国医生，并且保护了他们所拍摄的记录南京大屠杀的胶片。随后，他们冒着巨大的危险，成功刺杀了日军驻南京的最高指挥官熊本连太郎，还夺回了国宝——传国玉玺。最终，为了给遇难的三十万同胞报仇，他们决定在日军高官开会时与敌人同归于尽。